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QPCR檢測

瀏覽次數(shù):1026|來源:飛凡檢測 | 2021-10-29 16:33:23

技術(shù)原理:

將標(biāo)記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后,完成高溫變性,低溫復(fù)性,適溫延伸的熱循環(huán),并遵守聚合酶鏈反應(yīng)規(guī)律,與模板DNA互補(bǔ)配對的Taqman探針被切斷,熒光素游離于反應(yīng)體系中,在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光,隨著循環(huán)次數(shù)的增加,被擴(kuò)增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長,通過實時檢測與之對應(yīng)的隨擴(kuò)增而變化熒光信號強(qiáng)度,求得Ct值,同時利用數(shù)個已知模板濃度的標(biāo)準(zhǔn)品作對照,即可得出待測標(biāo)本目的基因的拷貝數(shù)。

概述

實時熒光定量PCR(RealTimePCR)技術(shù),是指在PCR指數(shù)擴(kuò)增期間通過連續(xù)監(jiān)測熒光信號強(qiáng)弱的變化來即時測定特異性產(chǎn)物的量,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲Chemicalbook線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。熒光定量PCR的熒光檢出方法包括SYBRgreen(熒光染料摻入法)和Taqmanprobe(探針法)兩種方法。

應(yīng)用

  1. 從動物細(xì)胞、人或動物組織等樣品中提取核酸;

  2. 對核酸進(jìn)行濃度及純度分析;

  3. 熒光定量PCR檢測;

    (1)引物和探針的設(shè)計與合成;

    (2)絕對定量和相對定量的選擇;

    (3)探針法和染料法的選擇;

    (4)熒光定量PCR儀對目的基因的檢測;Chemicalbook

    (5)數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析;

  4. 預(yù)實驗服務(wù):根據(jù)客戶提供的目的基因序列或NCBI序列號提供客戶引物和探針,并篩選出最優(yōu)化的引物和探針;

  5. 正式實驗服務(wù):根據(jù)預(yù)實驗篩選的引物和探針對所用樣品進(jìn)行熒光定量PCR的檢測,并對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計和分析。



飛凡檢測質(zhì)檢報告流程:


1、 提供產(chǎn)品資料

2、 工程師根據(jù)您的產(chǎn)品推薦合適檢測項目,并給出報價

3、 確認(rèn)報價沒有問題,然把樣品送到我們實驗室

4、 支付檢測費用,安排檢測

5、檢測完成,出具檢測報告,郵寄給客戶

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關(guān)于飛凡


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飛凡檢測致力于打造國內(nèi)專業(yè)的第三方檢測服務(wù)公司,不斷優(yōu)化整合市場檢測資源,飛凡檢測與多家科研院所,如上海同濟(jì)大學(xué),蘇州大學(xué),SGS,TUV,以及國內(nèi)眾多知名的檢測公司進(jìn)行深度合作,共同為國內(nèi)制造業(yè)服務(wù),為中國的制造業(yè)開拓海外市場保駕護(hù)航,為我們?nèi)粘I畹慕】蛋踩珮淞?biāo)桿;公司目前工程師百余人,95%以上是本科以上學(xué)歷;我們合作的實驗室通過CNAS,CMA(EZ),所出具的任何一張報告都有CNAS,CMA資質(zhì),確保出具的每份報告都具有權(quán)威的法律效力。


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