多肽測序

已經(jīng)被鑒定識別的天然肽多達數(shù)千種，它們在人類的生理過程中扮演著重要的角色，包括作為激素、神經(jīng)遞質(zhì)、生長因子、離子通道配體或抗感染等等。多肽類藥物被認為具有高選擇性和有效性，同時，具有相對安全和良好的耐受性。因此，人們對多肽類藥物在藥物研究和開發(fā)(R&D)方面的興趣越來越大，數(shù)百種多肽類藥物正在進行臨床試驗評估。

肽和蛋白質(zhì)都是由人體的基本組成部分-氨基酸組成，并通過肽鍵結(jié)合在一起。他們的區(qū)別在于肽是由比蛋白質(zhì)小的氨基酸鏈組成的。肽包含兩個或多個氨基酸，可細分為低聚肽和多肽，低聚肽含有少量的氨基酸(約2-20個氨基酸)，多肽則含有更多氨基酸。但是這個定義以及科學家使用每個術(shù)語的方式有時候并沒有那么嚴謹。蛋白質(zhì)是由一個或多個肽連接在一起而形成的。因此，蛋白質(zhì)本質(zhì)上是非常大的肽。一般情況下，我們按照氨基酸的數(shù)量對多肽和蛋白質(zhì)進行區(qū)分，多肽由2到50個氨基酸組成，而蛋白質(zhì)則由50個或更多的氨基酸組成。多肽類藥物研究具有巨大的潛力，如新肽的發(fā)現(xiàn)，更有針對性的肽庫和序列優(yōu)化設計，新配方的研發(fā)，多功能肽及復合物的研發(fā)等等。而要實現(xiàn)這些，對多肽進行鑒定，對多肽序列進行分析，是推動研究的第一步。

基于質(zhì)譜的多肽序列分析

多肽的序列測定常見的有兩種方法：數(shù)據(jù)庫搜索和de novo從頭測序法。比較短的肽段，比如小于30個氨基酸時，飛凡檢測采取直接進行二級碎裂的方式得到質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)進行肽段序列的推導，通過數(shù)據(jù)庫搜庫或者從頭測序的方式，即可獲得其理論序列。而對于長度比較長的肽段（>30個氨基酸），飛凡檢測會使用3種蛋白酶分別對靶肽段進行酶切和鑒定，在得到碎裂肽段片段的同時，經(jīng)過肽段之間的拼接完成肽段序列100%的測定，即通過從頭測序的方法進行測定。對于部分肽段混合物也可以基于上述方法進行序列分析。

飛凡檢測使用Thermo公司最新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀結(jié)合Nano-LC納升色譜技術(shù)，提供基于質(zhì)譜的多肽序列分析服務以及多肽de novo從頭測序服務，對多肽序列進行分析。我們使用Thermo公司最新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀實現(xiàn)對肽段樣品的序列分析，Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀是現(xiàn)在分辨率和靈敏度最高的質(zhì)譜儀，保證了低豐度肽段碎裂片段鑒定的靈敏度；同時在肽段碎裂過程中采取HCD與ETD結(jié)合的模式，保證肽段碎裂片段的完整性。得到質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)之后，對于小于30個氨基酸的肽段我們使用數(shù)據(jù)庫或de novo從頭測序的方式對原始數(shù)據(jù)進行解析。>30個氨基酸的肽段一般采用從頭測序的方式對多肽序列進行推導。

樣品制備的建議：

? 盡可能準備100 ug的樣品：<30 aa的樣品至少準備10-25 ug的樣品，>30 aa的樣品盡量準備至少>50 ug且純化的樣品；
? 盡量使用最純的試劑，而不是分子生物學級別的試劑；
? 盡量使用最小的離心管；
? 盡量避免污染物，或在溶液中對蛋白質(zhì)進行濃縮。

**可咨詢飛凡檢測的技術(shù)人員，有針對性的進行樣品制備。

飛凡檢測可對來自液體及固體狀態(tài)下的樣品進行多肽序列分析。固體樣品，使用冰袋運輸即可；溶液樣品，可進行真空抽干或冷凍抽干后，使用冰袋運輸，也可通過干冰對樣品進行運輸。歡迎來電咨詢。

飛凡檢測質(zhì)檢報告流程：

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  1、 提供產(chǎn)品資料

• 2、 工程師根據(jù)您的產(chǎn)品推薦合適檢測項目，并給出報價

• 3、 確認報價沒有問題，然后把樣品送到我們實驗室

• 4、 支付檢測費用，安排檢測

• 5、檢測完成，出具檢測報告，郵寄給客戶

• 咨詢熱線：18018131362

• 關(guān)于飛凡

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飛凡檢測致力于打造國內(nèi)專業(yè)的第三方檢測服務公司，不斷優(yōu)化整合市場檢測資源，飛凡檢測與多家科研院所，如上海同濟大學，蘇州大學，SGS，TUV，以及國內(nèi)眾多知名的檢測公司進行深度合作，共同為國內(nèi)制造業(yè)服務，為中國的制造業(yè)開拓海外市場保駕護航，為我們?nèi)粘Ｉ畹慕】蛋踩珮淞藯U；公司目前工程師百余人，95%以上是本科以上學歷；我們合作的實驗室通過CNAS，CMA（EZ），所出具的任何一張報告都有CNAS，CMA資質(zhì)，確保出具的每份報告都具有權(quán)威的法律效力。

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