CHO-DHFR重組蛋白表達(dá)服務(wù)

飛凡擁有高素質(zhì)的專家和十多年的上游生物制藥開發(fā)經(jīng)驗(yàn)，為您提供重組蛋白表達(dá)與抗體制備研究服務(wù)。飛凡檢測(cè)基于的CHO細(xì)胞，采用GS/DHFR表達(dá)系統(tǒng)。將進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)染評(píng)估以確保選擇穩(wěn)定的單克隆。我們的細(xì)胞系廣泛用于基因功能研究、基因編輯、藥物篩選和重組蛋白生產(chǎn)。

DHFR體系是目前被廣泛使用的體系，并且也是在工業(yè)生產(chǎn)中常用的方法。但該體系的缺點(diǎn)也是很明顯的，耗時(shí)耗力費(fèi)時(shí)費(fèi)力，并且獲得高產(chǎn)克隆需要重復(fù)選擇和克隆的循環(huán)。此外，通過Dhfr /Mtx 方法獲得的高產(chǎn)克隆通常不穩(wěn)定隨著細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間的延長，蛋白質(zhì)合成迅速減少。 

DHFR系統(tǒng)工作原理： 

圖1顯示了 DHFR 酶如何催化葉酸轉(zhuǎn)化為四氫葉酸。這種前體是細(xì)胞復(fù)制的，嘌呤和嘧啶從頭合成所必需的。

當(dāng) CHO 細(xì)胞中的蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)有 DHFR 缺失時(shí)，研究人員用重組 DNA轉(zhuǎn)染CHO 細(xì)胞，該 DNA 由與 DHFR 基因緊密相連的目的基因組成。甲氨蝶呤 (MTX) 選擇系統(tǒng)用于選擇產(chǎn)生目標(biāo)蛋白質(zhì)的 CHO 細(xì)胞。MTX 是一種類似于葉酸的藥物，它與 DHFR 結(jié)合，從而抑制四氫葉酸的產(chǎn)生，而四氫葉酸是嘌呤和嘧啶從頭合成所必需的。

在基因擴(kuò)增過程中，CHO 細(xì)胞在越來越高水平的 MTX 中培養(yǎng)。將選擇具有增加的 DHFR 基因拷貝并結(jié)合感興趣的基因的 CHO 細(xì)胞。

DHFR 水平不足的 CHO 細(xì)胞被剝奪了核苷前體（次黃嘌呤和胸苷）并死亡。一旦被選中，來自 CHO DHFR 陰性宿主的轉(zhuǎn)染細(xì)胞系不需要培養(yǎng)基中的 MTX。 

服務(wù)內(nèi)容：

飛凡檢測(cè)質(zhì)檢報(bào)告流程：

1、 提供產(chǎn)品資料

2、 工程師根據(jù)您的產(chǎn)品推薦合適檢測(cè)項(xiàng)目，并給出報(bào)價(jià)

3、 確認(rèn)報(bào)價(jià)沒有問題，然后把樣品送到我們實(shí)驗(yàn)室

4、 支付檢測(cè)費(fèi)用，安排檢測(cè)

5、檢測(cè)完成，出具檢測(cè)報(bào)告，郵寄給客戶

咨詢熱線：18018131362

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