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利用斑馬魚評價(jià)細(xì)胞凋亡
【評價(jià)原理】
細(xì)胞都有一個(gè)固定死亡的程序,細(xì)胞凋亡通過去除潛在的損傷細(xì)胞和分化后多余的細(xì)胞來保護(hù)機(jī)體,在脊椎動(dòng)物中尤為重要。在斑馬魚DNA數(shù)據(jù)庫中已鑒定出許多與哺乳動(dòng)物同一家族的凋亡相關(guān)基因。這暗示了大部分凋亡通路在斑馬魚與高等脊椎動(dòng)物的進(jìn)化上有很高的保守性,因此,在凋亡的研究領(lǐng)域上,斑馬魚被認(rèn)為是一種有效的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。
吖啶橙(AO)能透過胞膜完整的細(xì)胞,嵌入細(xì)胞核DNA,使之發(fā)出明亮的綠色熒光。凋亡的細(xì)胞呈現(xiàn)為染色增強(qiáng),熒光更為明亮,均勻一致的圓狀或固縮狀、團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)。
基因組DNA斷裂時(shí),暴露的3'-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶的催化下加上熒光素 (FITC) 標(biāo)記的dUTP (fluorescein-dUTP) ,從而可以通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測。
用兩種不同的特異性熒光染色,均可以在熒光顯微鏡下觀察到凋亡細(xì)胞。
【實(shí)驗(yàn)方案】
我們將受測試斑馬魚分成兩組,分別是正常對照組和供試品組。供試品通過服用的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)(供試品通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。
服用一段時(shí)間供試品后,我們分別對斑馬魚整體做兩種凋亡細(xì)胞特異性染色,用熒光顯微鏡觀察細(xì)胞凋亡。
【結(jié)果展示】
【評價(jià)結(jié)論】
1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實(shí)驗(yàn),供試品組斑馬魚出現(xiàn)凋亡細(xì)胞熒光強(qiáng)度比正常對照組明顯增強(qiáng)。
2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了供試品誘發(fā)斑馬魚細(xì)胞凋亡。
飛凡檢測質(zhì)檢報(bào)告流程:
1、 提供產(chǎn)品資料2、 工程師根據(jù)您的產(chǎn)品推薦合適檢測項(xiàng)目,并給出報(bào)價(jià)
3、 確認(rèn)報(bào)價(jià)沒有問題,然后把樣品送到我們實(shí)驗(yàn)室
4、 支付檢測費(fèi)用,安排檢測
5、檢測完成,出具檢測報(bào)告,郵寄給客戶
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飛凡檢測致力于打造國內(nèi)專業(yè)的第三方檢測服務(wù)公司,不斷優(yōu)化整合市場檢測資源,飛凡檢測與多家科研院所,如上海同濟(jì)大學(xué),蘇州大學(xué),SGS,TUV,以及國內(nèi)眾多知名的檢測公司進(jìn)行深度合作,共同為國內(nèi)制造業(yè)服務(wù),為中國的制造業(yè)開拓海外市場保駕護(hù)航,為我們?nèi)粘I畹慕】蛋踩珮淞?biāo)桿;公司目前工程師百余人,95%以上是本科以上學(xué)歷;我們合作的實(shí)驗(yàn)室通過CNAS,CMA(EZ),所出具的任何一張報(bào)告都有CNAS,CMA資質(zhì),確保出具的每份報(bào)告都具有權(quán)威的法律效力。
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